GST融合蛋白沉降技术(GST pull down)是在体外研究蛋白质相互作用的常用方法,常用于检测已知蛋白之间的互作,也可筛选与已知蛋白互作的未知蛋白。
实验原理
将体外表达的GST融合蛋白结合到谷胱甘肽Beads上,再将靶蛋白-GST-Beads和细胞裂解液孵育,这样互作蛋白便一起被吸附在Beads上。在洗掉未结合的蛋白后,用洗脱液将互作蛋白复合物从Beads洗脱下来,即GST pull down产物。这种互作复合物既可以用Western Blot检测已知蛋白,也可用质谱鉴定出未知蛋白。
服务内容
迈凯迪生物拥有庞大的硕博团队,凭借丰富的科研经验,提供成熟的分子互作实验服务,包括蛋白与蛋白、蛋白与DNA、蛋白与RNA、RNA与RNA等分子间的互作技术,实验结果稳定可靠。
迈凯迪生物会根据客户需求评估后得到合适的实验方案,提供完整的售前售后咨询和建议,客户可以随时咨询售后服务。
实验流程
实验材料-蛋白提取-孵育-蛋白结合-洗脱-检测
实验周期
(1)验证型实验4周左右
(2)筛选型实验:5周
实验项目
1.诱饵蛋白原核表达和Western blot检测
2.GST pull down捕获诱饵蛋白及其互作蛋白
3.LC-MS/MS检测及数据分析
样本要求
(1)WB:2-4g/组;3*10e7个细胞/组(约3个10cm皿);50ul菌体沉淀/组。
(2)MS:2-8g/组;5*10e7个细胞/组(约5个10cm皿);100ul菌体沉淀/组。
要求:待测样品-80℃保存,干冰取样/运输,至少在送样前2-3天通知本公司订单负责人。
交付(根据检测项目交付)
1.实验报告
2.检测图
3.互作蛋白筛选结果
4.生物信息学分析结果和报告
服务优势
服务案例丰富;
方案建议中肯,供客户选择多;
自有分子及细胞生物实验平台;
自有蛋白质组学平台;
售后技术支持服务完善。